Какие сдать анализы на коклюш у детей: расшифровка результатов, цены в клиниках Гемотест и Инвитро

Содержание

Какие анализы надо сдать

Для диагностики коклюша недостаточно видеть клиническую картину. Подтверждают диагноз с помощью ряда исследований:

  • Анализ крови на коклюш;
  • Серологический (ИФА);
  • Мазок из носоглотки;
  • Молекулярно-генетический тест (ПЦР).

Обычно детям не назначаются сразу все исследования. Врач решает, какие анализы сдавать, исходя из симптоматики, времени появления признаков болезни, возраста ребенка и других факторов.

ОАК

Общий анализ крови помогает определить состав плазмы, обнаружить признаки воспалительной реакции, предоставляет неспецифическую информацию о заболевании у ребенка. ОАК назначают при любой затянувшейся или остро протекающей простуде.

Забор крови производится на голодный желудок, предпочтительно утром. Собранный образец анализируется вручную или с помощью гемоанализатора. Когда в результате обработки анализа обнаруживаются признаки коклюша, дополнительно проводится ручное исследование. Срок получения результатов – 1 день без учета дня сбора анализа.

Бакпосев

Обнаружить коклюш позволяет посев отделяемого из носоглотки у ребенка. Параллельно мазок исследуется на клеточный состав. Результаты анализа на коклюш достоверны, если исследование проводят не позже 3-х недель от появления первых симптомов. Оптимальным временем для анализа считается первая неделя болезни. Выполнение бакпосева требует определенной подготовки.

Не следует перед сдачей материала:

  • Кушать, пить в среднем за 2,5 часа до времени проведения посева;
  • Чистить зубы, полоскать рот, горло;
  • Интенсивно высмаркиваться;
  • Закапывать в нос капли, пить антибиотики.

Процедура включает забор отделяемого из горла, носа при помощи тупфера – стерильного тампона на палочке. Отдельный тампон вводят в носовые проходы, вторым тупфером проводят по миндалинам, задней поверхности глотки. Рекомендуется сдавать анализ дважды – через 1 день или 2 дня подряд.

В качестве альтернативы забор материала осуществляют на «кашлевую пластинку». Слизь попадает на нее, когда ребенок кашляет или чихает.

После взятия материала, тупферы помещают в специальные пробирки со средой, в которых жизнедеятельность патологических организмов будет поддерживаться искусственно. На протяжении нескольких дней наблюдают за ростом микроорганизмов.

Анализ производится с учетом скорости роста и распространения бактерий коклюша, ферментативной активности. Для уточнения клеточного состава проводится забор материала на предметное стекло. В дальнейшем его окрашивают, рассматривают под микроскопом и описывают.

Предварительные результаты доступны в течение 5-ти дней, окончательные – не позднее, чем через неделю.

ПЦР

Достоверность результатов полимеразной цепной реакции при диагностике коклюша составляет 100%, если анализ проводится не позднее месяца от обнаружения симптомов. За 2-3 часа до проведения исследования нельзя кушать, пить, чистить зубы. Перед забором отделяемого можно прополоскать рот теплой кипяченой водой.

Образец материала берут из носоглотки тупфером, помещают в амплификатор, куда добавляют ферменты или праймеры, ведущие к копированию ДНК бактерии. Детектор, которым оборудован амплификатор, позволяет точно генетические цепи, присущие возбудителю коклюша. Результаты обычно готовы в течение 2-х дней.

ИФА

Исследование назначается спустя 2-3 недели от момента первых симптомов заболевания, когда бакпосев уже не информативен. При подготовке к исследованию нельзя пить, кушать, за 12 часов детям не рекомендуется испытывать физическую нагрузку. Анализ рекомендуется сдавать дважды, с перерывом от 10 до 14 дней.

В ходе исследования сыворотку крови помещают в специальные ячейки с антигенами к бактерии – возбудителю коклюша и паракоклюша, затем смешивают с помеченными ферментами иммуноглобулинами. Происходит расщепление, в результате которого смесь приобретает определенный цвет. Интенсивность окраски свидетельствует о количественном составе антител. Подсчет точного числа определяется фотометрическими анализаторами. Срок готовности результатов – до 8 дней.

Расшифровка

Общий анализ не показывает присутствие коклюша в организме ребенка. Однако при коклюше отмечается снижение количества лейкоцитов и повышение лимфоцитов. Показатели СОЭ не повышены. При атипичной форме результаты могут быть в норме. Более специфичными анализами являются бакпосев, ПЦР и ИФА.

Достоверность результатов бакпосева зависит от срока сдачи анализа. На первой неделе точность составляет порядка 90%, через 3 недели после появления симптомов не превышает 20%. Диагноз ставят на основе обнаружения в материале колоний бактерий и подтверждения факта их роста.

Точность результатов, полученных при сдаче серологического анализа крови на коклюш у детей, оценивается приблизительно в 70%, а специфичность составляет 100%.

В процессе исследования проверяется наличие антител трех групп:

  • IgG говорит о пройденной иммунизации или о том, что ребенок болел коклюшем;
  • IgM указывает на острую фазу болезни либо недавно проведенной вакцинации;
  • IgA свидетельствует о том, что малыш болеет коклюшем на день проведения исследования.

Показатели оцениваются качественно и количественно. В первом случае результат фиксируется как положительный, отрицательный, сомнительный. Количественные границы нормы определяются каждой лабораторией отдельно.

Норма анализа на коклюш у ребенка:

Антитела Возраст, лет Показатель нормы, МЕ/ мл
 

IgA

0-4 2
5-10 6
>11 12
 

IgG

<1 38
1-4 26
5-10 22
>10 38
IgM 0,8

Превышение указанных показателей – положительный результат, означает, что ребенок болен коклюшем.

Точность результатов ПЦР – 90%. Расшифровка анализа на коклюш свидетельствует о присутствии бактерии (положительный результат) или ее отсутствии (отрицательный). Анализ считается наиболее специфичным.

Как и где сдавать

Для каждого анализа предусмотрена своя процедура забора материала:

  • Для ОАК у ребенка берут капиллярную и венозную кровь;
  • ИФА проводится на основе венозной;
  • При проведении бакпосева и ПЦР используют отделяемое из носа и горла.

Исследования проводятся в частных и государственных лабораториях по назначению врача.

Клиника Гемотест

Медицинская лаборатория Гемотест, центры которой расположены в 65 городах России, выполняет различные анализы, направленные на обнаружение коклюша. Здесь поводят несколько видов исследований.

Наименование Цена, руб
Клинический анализ, включая лейкоформулу, СОЭ 670
Посев 1.000
IgG 820
IgA 830
IgM 820
Исследование мокроты 440

Методы диагностики

Диагностика в большинстве случаев проводится клиническим признакам, хотя для полной картины необходимо взятие мазка из носоглотки и проведение исследованиякрови. Только так можно точно диагностировать болезнь и убедиться в том, что не развиваются осложнения и имеет место непосредственно коклюш.

Так как заболевание бактериальное, то в мазке обнаруживаются его возбудители. В крови же присутствуют антитела к бактерии. Сам возбудитель встречаться в крови не должен, так как если он проникнет в кровоток, разовьётся сепсис (заражение крови).

Что даёт анализ крови?

В первую очередь проводится общий анализ крови , который весьма информативен. Осуществляется он даже в простой лаборатории и потому его сделают в любом медицинском учреждении.

При коклюше в составе крови выявляется значительное увеличение лейкоцитов (иммунных клеток).

Серодиагностика

Более сложным анализом является серодиагностика, при которой в сыворотке крови выделяют антитела, показывающие протекающий инфекционный процесс, а также наличие прививочного или постперенесённого иммунитета к болезням.

Реакция на агглютинации

Это самый популярный анализ крови при коклюше у детей. Этот способ выявления заболевания успешно используется около 50 лет. При данной методике в составе крови выявляют специфические антитела против антигенов возбудителя, выделяемых в первой фазе болезни. Несмотря на популярность, методика имеет существенный недостаток, которым является неспецифичность. При анализе определить конкретно бактерию коклюша невозможно.

Этот вид анализа, хоть он и применяется много лет, не имеет единой системы проведения, и потому результаты могут иметь не одинаковые трактовки в разных лабораториях.
Какой методикой пользоваться, определяет лечащий врач в зависимости от возможностей медицинского учреждения и состояния больного. Возможно одновременное исследование материала и по нескольким методикам.

Реакция латекс-микроагглютинации

Эта методика весьма эффективна и при этом не требует серьёзных материальных затрат от медицинского учреждения. К сожалению, простота анализа приводит не редко и к его ложноположительному результату, который связан с применением антигенов возбудителя в фазе распада.

Во время анализа сыворотку крови, которая разведена в пропорции 1:1, добавляют к полистироловому латексу, который наполнен компонентами палочки коклюша. По тому, какое будет окрашивание, определяется наличие антител к возбудителю в крови.

Реакция нейтрализации более трудоёмка, но и более правдива. При подобном исследовании выявляется количество антител, входящих в кровь и направленных против коклюшной палочки. Проводят анализ преимущественно на клеточном субстрате, полученном из яичников китайских хомяков. Изменения, происходящие с субстратом, и показывают объём антител. Достоинством этой процедуры является возможность выявить даже немногочисленные антитела против возбудителя болезни, которые не определяются при других способах исследования материала. Однако есть у анализа и минус, которым является его сложность и трудоёмкость, а также возможность проведения его не в любой больнице.

ИФА исследование

Иммуноферментный анализ применяется для выявления коклюша с 1980 года. Подобное исследование максимально специфичное и даёт предельно точные показатели, но только при грамотном его проведении.

Сыворотку крови, которая исследуется на антитела, к палочке коклюша добавляют в раствор или клеточную среду, в которой присутствуют возбудители болезни или их части. Также в такой состав добавляется и особый флуоресцеин, содержащий фермент. Он оседает на соединении «антитело и антиген», делая его хорошо видимым под обычным микроскопом.

Проводить такое исследование надо на 4 недели болезни, когда в крови содержание антител достигает высоких значений. До этого точные результаты получить сложно. На ранних сроках лучше проводить посев материала с мазка на бактериальную среду.

ПЦР — диагностика

ПЦР — это максимально чувствительный и точный способ. Берется мазок из зева, и затем посредством фермента ДНК — полимеразы достраиваются копии наследственного материала — Bordtella pertussis, возбудителя инфекции. Этот метод позволяет поставить диагноз со 100% точностью.

Анализ на коклюш с помощью серологических реакций

Возбудители коклюша содержат вещества (антигены), способные вызвать иммунный ответ в организме инфицированного человека (образование антител). Благодаря серологическим исследованиям выявляются и изучаются антитела и антигены в сыворотке крови больного. В их основе лежат иммунные реакции организма. Специфичность данного вида исследования не достигает 100%, поэтому результаты серологического исследования оцениваются только с учетом клинической картины заболевания. Серологические методы используются так же для проведения эпидемиологического анализа.

Для диагностики коклюша используется несколько тестов:

  • Иммуноферментный анализ (ИФА) — чувствительный, специфичный и относительно недорогой тест. Для его проведения используются белковые антигены бактерий коклюша, с помощью которых измеряются сывороточные иммуноглобулины классов G, M и A, уровень которых повышаются в крови после перенесенного заболевания или проведения иммунизации. Сывороточные иммуноглобулины M повышаются в ранние сроки заболевания, сывороточные иммуноглобулины G — в более поздние сроки.
  • Диагностика коклюша на поздних сроках заболевания осуществляется с помощью реакций агглютинации: РПГА, РНГА и РА. В основе таких реакций лежит способность корпускулярных антигенов склеиваться с помощью антител.

Серологические методы исследования

Анализ крови на коклюш и паракоклюш для серологического исследования назначают тем пациентам, которые болеют не менее 3 недель. За это время в крови ребенка вырабатываются антитела, которые и необходимо обнаружить при исследовании. На ранних стадиях болезни этот метод не информативен.

ПЦР – полимеразную цепную реакцию при коклюше назначают чаще всего, так как ее результаты наиболее точные. Для исследования собирают мокроту. Анализ на определение антител к коклюшу проводится на автоматизированном оборудовании. Результаты оцениваются согласно нарастанию титров специфических антител к возбудителю. Анализы проводят несколько раз. Чем дольше человек болеет, тем титры продолжают увеличиваться, несмотря на угасание симптомов. Повторные анализы делают с интервалом 5-7 дней.

Подготовка к ИФА анализу
ИФА – иммуноферментный анализ крови при коклюше у детей. Его главная цель – обнаружение иммуноглобулинов М (IgM). Это антитела, которые первыми реагируют на появление коклюшной палочки. Они обеспечивают дальнейшую защиту всего организма от внедренной инфекции.

Правила забора крови у детей:

  1. Сдавать кровь нужно натощак, лучше с утра, через 12 часов после последнего приема пищи. В это время можно пить воду. Если ребенок грудного возраста, кормления разрешаются.
  2. Кровь берут из вены путем пункции. Прием лекарств перед анализом может дать ложный результат.
  3. Кровь берут в стерильную пробирку (пустую или с гелем).
  4. После того как ребенок сдал анализ, можно возвращаться к обычному режиму дня и приему лекарств.

РПГА – реакция пассивной гемагглютинации. Этот метод определяет не только титры к антителам, он также позволяет выяснить чувствительность организма к антибактериальным препаратам и правильно подобрать лекарственные средства индивидуально каждому ребенку. Кровь также сдается натощак из локтевой вены.

Анализ обладает высокой специфичностью, поэтому его часто назначают для определения бактериальной инфекции. При попадании микроба в организм, как иммунный ответ формируются антитела, которые адсорбируются на поверхности эритроцитов. При исследовании добавляют специальную сыворотку, которая приводит к их агглютинации (склеиванию). Эта реакция позволяет опровергнуть или подтвердить наличие возбудителя в организме.

При исследовании определяют количество эритроцитов, выпавших в осадок. Результат предоставляют в виде титров антител.

Диагностика коклюша: лабораторная, дифференциальная у детей и взрослых

Диагностика коклюша на основании характерных клинических симптомов не представляет затруднений в спазматический период, когда имеют место характерные приступы лающего кашля с репризами. Однако стоит понимать, что такой кашель возникает лишь при типичном течении коклюша, почти всегда имеет место у детей и достаточно редко развивается у взрослых.

Кроме того, диагноз коклюша, который устанавливается уже при наличии характерного кашля, должен считаться поздним как в эпидемиологическом плане (человек является источником возбудителя преимущественно в катаральный период заболевания), так и в клиническом плане (запоздалая диагностика коклюша не дает возможности своевременного начала необходимой терапии). Таким образом, диагноз должен быть поставлен в катаральный период. Для этого используются эпидемиологические, клинические и лабораторные данные. Наличие данных о контакте с больным, а также характерной клинической симптоматики в виде кашля, который усиливается изо дня в день, нарастает под вечер и в ночные часы и не устраняется, несмотря на прием симптоматических средств, позволяет заподозрить эту инфекционную патлогию.

Лабораторная диагностика и анализ крови

Подтвердить клинические предположения коклюша позволяет анализ крови. Так, в общем анализе наблюдается характерная картина – лейкоцитоз, причем увеличение количества лейкоцитов происходит за счет абсолютного увеличения числа лимфоцитов (абсолютный лимфоцитоз), при этом СОЭ остается нормальным, что позволяет отличить коклюш от любой другой бактериальной инфекции, при которой в анализе будет наблюдаться повышение числа лейкоцитов за счет нейтрофилов, а также сдвиг лейкоцитарной формулы влево и увеличение СОЭ.

Абсолютного подтверждения диагноза, однако, общий анализ крови не дает. Верифицировать заболевание удается за счет проведения бактериологического исследования.

Также на практике для подтверждения диагноза часто используют серологический анализ при коклюше. В частности, используют реакции агглютинации, реакцию связывания комплемента и реакция пассивной гемагглютинации. При любом серологическом исследовании диагностически значимым считается увеличение титра антител в 4 и более раза в течение 10-14 дней.

В каких случаях показано обследование на коклюш

Лабораторное обследование на коклюш рекомендуется проводить следующим категориям населения:

  • детям, кашляющим более 5-7 дней (особенно если кашель имеет приступообразный характер);
  • лицам, которые тесно контактировали с больным коклюшем дома, в садике, в школе, на работе;
  • взрослым с подозрением на коклюш (особенно если в семье есть грудные дети или же если больной является работником детского учреждения).

Важно

Роль взрослых в распространении коклюша среди детей очень высокая – это доказали многочисленные научные исследования. У взрослых болезнь протекает зачастую как затянувшееся ОРЗ, а кашель не имеет характерных для рассматриваемого заболевания черт. Поэтому многие врачи и сами больные не задумываются о коклюше, считая его исключительно детской болезнью. В таких ситуациях пролить свет на истинную причину недомогания может только лабораторная диагностика.

Результаты

После того как кровь на коклюш или мазки слизи сданы, придется подождать результатов. Время, необходимое для проведения каждого исследования, отличается. Например, если для общего анализа крови и микроскопии требуются всего сутки, то для других тестов нужно больше времени. При этом следует учитывать, что день, в который сдаются пробы, обычно не учитывается. Но в экстренных случаях все производится, конечно, быстрее.

Каждый анализ может показать, что в организме присутствует возбудитель коклюша и паракоклюша. Только одни более специфичны, а другие – менее. Результаты выдаются лабораторией на специальном бланке, где указаны фактические значения и референсные. Поэтому, сравнив их, можно сделать предположение о происхождении изменений в организме. Но следует учитывать, что расшифровка результатов производится только врачом.

Общий анализ крови

Наименьшей специфичностью обладает клинический анализ крови при коклюше у детей. В нем отмечается уменьшение числа лейкоцитов (лейкопения), относительное повышение лимфоцитов. СОЭ не реагирует или немного падает. Такая картина характерна для катаральной стадии заболевания. Следует учитывать, что степень изменений пропорциональна тяжести состояния. У пациентов со стертыми формами болезни, привитых или в период выздоровления все может быть в пределах нормы.

Мазок из носоглотки

Микроскопически Bordetella pertussis выглядит как грамотрицательная (розовая) палочка. Но чтобы сказать точно, нужно посмотреть на результаты посева. На питательной среде она растет в форме мелких круглых колоний с блестящей поверхностью, образуя зону гемолиза. Ферментативной активностью не обладает. Выявление роста говорит о позитивном анализе и подтверждает коклюш. Дополнительно оценивается чувствительность бактерии к наиболее распространенным антибиотикам.

Получение чистой культуры коклюшных палочек свидетельствует о болезни ребенка и требует соответствующего реагирования со стороны врача.

Серологический анализ

Определение антител к возбудителю инфекции – метод с довольно высокой специфичностью. Но расшифровка анализа на коклюш зависит от времени взятия биоматериала, продолжительности болезни и состояния общего иммунитета. Есть два метода определения иммуноглобулинов: качественный и количественный. При первом результат содержит лишь слова «отрицательно», «положительно» или «сомнительно». А во втором случае есть цифры, указывающие, сколько именно антител выявлено в крови пациента. Зачастую они написаны в анализе вместе. Но в лабораториях используют различные реагенты и тест-системы, поэтому назвать конкретные цифры сложно. Например, при использовании анализаторов EUROIMMUN (Германия) верхние границы нормы следующие (таблица):

Поэтому, когда в анализе IgM превышают 0,8, а IgG уже 40, то результат положителен, а инфекция однозначно есть. В более общем виде диагностическими критериями коклюша при ИФА будут:

  • У взрослых и привитых детей: увеличение в 4 и более раз IgG и IgA.
  • У детей, не привитых от болезни: даже однократное обнаружение любых антител.

Следует понимать, что при выявлении иммуноглобулинов М коклюш находится в острой фазе (активная инфекции), но это же свидетельствует и о недавней вакцинации. Антитела класса G указывают на продолжительность текущей болезни, перенесенную в прошлом патологию или сформированную защиту после активной иммунизации. А секреторные IgA говорят о том, что ребенок на момент проведения анализа болен коклюшем. В сомнительных случаях необходимо сделать повторное исследование. Если он окажется отрицательным, то и повода для переживаний не будет.

Молекулярно-генетический метод

Результат ПЦР-диагностики является наиболее чувствительным и специфичным. Он может быть либо положительным, либо отрицательным. В первом случае выявлен генетический материал Bordetella pertussis (parapertussis), что однозначно свидетельствует о заболевании. Но и во втором случае исключать такую вероятность нельзя, ведь в исследуемом биоматериале просто могло не оказаться бактерий или их ДНК было меньше, чем положено для выполнения анализа. Поэтому большую роль играет правильное взятие слизи.

Сбор анализов по возрастам

Столкнувшись с рекомендацией о сдаче анализов на коклюш, не все люди знают, как правильно собирать биоматериал.

Так, в детской практике довольно затруднительно собрать у малыша мокроту. Ребенок отказывается плевать в баночку, он капризничает, плачет. Приходится долго уговаривать. Тоже касается и сбора мочи. Забор крови также воспринимается детьми негативно. Однако, все трудности вполне можно преодолеть, ведь результат получить крайне важно, чтобы правильно составить план лечебных мероприятий.

У пожилых людей таких проблем, конечно, не возникает, но сбор биоматериал имеет, все же, свои нюансы. Исходя из возраста пациента, у него могут быть соматические патологии, требующие ежедневного приема медикаментов. Препараты могут сказаться на качестве итогового результата анализов на коклюш. Чтобы избежать ошибок диагностического характера, лучше заранее обговорить с лечащим врачом подобные особенности.

Как распознать начало течения коклюша?


Острая инфекционная болезнь протекает в несколько этапов. Выделяют четыре периода развития коклюша:

  1. Инкубационный (от трех до четырнадцати дней).
  2. Катаральный (около двух недель).
  3. Судорожный или спазматический.
  4. Обратное развитие (в среднем длится от двух до 12 недель).

Уже на стадии катарального течения можно сделать анализ на выявление палочки Бордетеллы. В этот период начинает беспокоить сухой навязчивый кашель без повышения температуры. Кашлевые толчки усиливаются к вечеру и не проходят даже после приема противокашлевых препаратов. Других симптомов заболевания не отмечается.

В катаральный период течения коклюша расшифровка анализа периферической крови поможет определить лейкоцитоз, то есть, значительное повышение лейкоцитов. Обычно показатели поднимаются до 15-40*109/л. При этом скорость оседания эритроцитов (СОЭ) остается в норме.

При наступлении судорожного периода все симптомы коклюша станут очевидными. Характерным признаком являются частые кашлевые толчки со свистящим вдохом (реприз). Цикличность кашля повторяется в среднем от 2 до 15 раз. При тяжелом течении у пациентов период может насчитывать 50 циклов.

При этом, внешний вид больного не оставляет сомнений, что у него коклюш:

  • Глаза наливаются кровью;
  • Лицо краснеет или приобретает синюшный оттенок;
  • Язык выталкивается из ротовой полости и свисает с загнутым кончиком;
  • Венозные сосуды головы набухают;
  • После приступа выделяется вязкая мокрота, может возникать рвота.

В период обратного развития симптоматика ослабляется и через некоторое время исчезает.

Общие клинические анализы

Общий анализ крови
При коклюше и паракоклюше, как при любых инфекционно-воспалительных заболеваниях, назначают общее клиническое исследование крови
.

Основные показатели крови, такие как эритроциты, тромбоциты, гемоглобин, СОЭ (скорость оседания эритроцитов) без особых изменений.

В острый период заболевания могут быть повышены лейкоциты и лимфоциты.

Время взятия общего анализа крови при коклюше значение не имеет. Прием пищи или лекарств не влияет на лейкоцитарную формулу и количественный состав компонентов крови.

Клиническое исследование крови не является основополагающим в постановке диагноза при коклюше.

Анализ на коклюш с применением ПЦР

Диагностика коклюша с применением ПЦР (полимеразной цепной реакции) является самой перспективной методикой в современных условиях. Высокая чувствительность теста позволяет выявлять ДНК бактерий, даже если в исследуемом материале их несколько единиц.

Методика определения ДНК Bordetella pertussis с помощью ПЦР была разработана в Новосибирске в 1999 году. Она имеет целый ряд преимуществ перед бактериологическим методом:

  • Высокая чувствительность данного метода. Даже наличие одного или нескольких возбудителей в пробе позволяет получить положительный результат.
  • Данный метод является высокоспецифичным. Удельный вес положительных результатов составляет 85 — 100%. Загрязнение вторичной микрофлорой не влияет на результат исследования.
  • Результат получается в течение 1-го дня.

Данный метод диагностики не заменяет культуральный метод.

Бактериологический метод и методика ПЦР являются взаимодополняющими и достоверными тестами при выявлении Bordetella pertussis.

колонии Bordetella pertussis

Рис. 6. На фото виды колоний Bordetella pertussis.

Подготовка к ПЦР и бактериологическому методу исследования

Если при сдаче анализа крови существует не так много ограничений, то для проведения бакпосева или молекулярного способа диагностики очень важно получить чистый биологический материал без примесей каких-либо добавок (пищевых, лекарственных и др.). Также большое значение имеет профессионализм лаборанта, который будет брать мазок слизи из зева или носоглотки. Если забор производится не из того места, где сосредоточен инфекционный возбудитель, результат анализа будет ложным.

Перед сдачей слизистого отделяемого из ротоглотки нужно придерживаться следующих правил:

  • Не принимать пищу или спиртных напитков в течение четырех часов до посещения лаборатории;
  • Запрещено чистить зубы натощак, иначе образец материала будет смыт или испорчен;
  • Не принимать лекарственных средств перед сдачей анализа;
  • Рекомендовано только прополоскать рот обычной кипяченой водой без добавок.

Проведение

При подозрении на коклюш или паракоклюш диагноз не может быть поставлен лишь на основании клинических данных. Поэтому выполняют различные лабораторные исследования. К наиболее распространенным относятся:

  • Общий анализ крови.
  • Мазок из носоглотки (микроскопия, посев).
  • Серологический анализ.
  • Молекулярно-генетический метод.

Каждое исследование имеет определенные особенности, требующие отдельного рассмотрения. Какой анализ нужно сдавать пациенту, скажет врач. Специалист проведет клиническое обследование и делает предварительное заключение, на основании которого проводится дальнейшая диагностика. Он выдает направление на лабораторные тесты.

Целесообразность анализов и их объем определяется врачом. Диагностику необходимо пройти в кратчайшие сроки, поскольку от ее результатов всецело зависит лечение.

Общий анализ крови

Для проведения общего анализа пациент приходит в лабораторию натощак. Другой подготовки не требуется. Кровь берется из пальца в тонкую стеклянную трубочку-капилляр. Затем медработник подсчитывает количество форменных элементов, гемоглобина, определяет СОЭ и цветной показатель. Срок выполнения составляет 1 сутки. Безусловно, это неспецифический анализ, который проводят при многих заболеваниях.

Мазок из носоглотки

Важным анализом на коклюш у детей является мазок из носоглотки. Он позволяет оценить клеточный состав слизи и выявить в ней патогенные микробы. Перед взятием биоматериала не рекомендуют:

  • Полоскать горло, чистить зубы.
  • Принимать антибиотики, закапывать нос.
  • Сильно высмаркиваться.
  • За 2–3 часа принимать пищу и пить воду.

Исследование проводится на ранних сроках болезни (не позже 3 недель с момента начала), в противном случае результаты могут быть ложноотрицательными. Мазок берется стерильным тупфером – ватным тампоном на длинной палочке – отдельно из носа и горла. Ребенку следует широко приоткрыть рот и немного запрокинуть голову назад. Одним тупфером проводят по задней стенке глотки и миндалинам, а другой вводят в носовые ходы. Тампоны помещаются в пробирки со специальной транспортировочной средой, которая будет поддерживать жизнедеятельность бактерий.

Для цитологии материал наносится на предметное стекло, фиксируется и окрашивается по Грамму. Затем картина описывается под микроскопом. А вот бакпосев – это более длительный анализ. Возбудителю коклюша нужна специфическая питательная среда (кровяной агар). На нее засевается слизь из носоглотки, а затем все инкубируется в термостате. Появившиеся колонии микробов оценивают морфологически и функционально (ферментативная активность, скорость роста).

Материала от пациента можно получить и по-другому – методом «кашлевых пластинок». Тогда открытую чашку Петри с питательной средой подносят к больному ребенку. И в момент кашля слизь сама попадает на нее. Это позволяет исключить этапы взятия мазка и рассевания.

Серологический анализ

Серологическая диагностика коклюша основана на определении антител к возбудителю. Анализ крови на коклюш включает идентификацию в плазме различных классов иммуноглобулинов (A, M, G). Каждый из них показывает, насколько сильно идет защитная реакция со стороны организма. Антитела класса А являются секреторными, они обеспечивают местную защиту слизистых оболочек. Иммуноглобулин M начинает вырабатываться уже спустя 10–14 дней от момента инфицирования. А вот антитела класса G продуцируются значительно позже (через 3–4 недели). Кровь для анализа берется у ребенка из вены натощак.

Детекция антител производится методом иммуноферментного анализа (ИФА). В его основе лежит специфическая реакция между антигеном и антителом. Сыворотку, полученную от пациента, по капле помещают в ячейки иммунологического планшета, в которых уже есть стандартные антигены к Bordetella pertussis.

тем в образовавшийся комплекс подмешивают антитела к иммуноглобулинам, меченные специальным ферментом. Последний при обнаружении гомологичных молекул расщепляет бесцветное вещество (хромоген), придавая раствору в ячейках окраску. Ее интенсивность как раз и определяется количеством антител в крови пациента. Подсчет концентрации происходит в фотометрических анализаторах.

Серологический метод является очень распространенным исследованием, позволяющим определить антитела к инфекционным болезням.

Молекулярно-генетический метод

Метод полимеразной цепной реакции – еще один анализ, проводимый при коклюше. Он основывается на определении генетического материала (ДНК) бактерии-возбудителя. Для этого анализа берется соскоб из ротоглотки: стерильным тупфером проводят по слизистой оболочке. В лаборатории к биоматериалу добавляются специальные вещества (праймеры, ферменты), которые позволяют многократно копировать фрагменты нуклеиновых кислот. Все это происходит в приборе под названием амплификатор. Он же оборудован и детектором для идентификации генетических цепей микроорганизмов. ПЦР диагностика коклюша – наиболее сложный, но в то же время и самый чувствительный метод, многократно повышающий достоверность анализов.

Анализ мочи и мокроты

Лабораторные исследования предусматриваются при подозрении на коклюш, сдавать анализы мочи и мокроты. Они позволяют оценить физико-химические характеристики – цвет и прозрачность, кислотность и удельный вес. В анализе мочи – присутствие осадка, в мокроте – кровянистые прожилки.

На правильность результата влияет то, как пациент собирает биоматериал. Для этого обязательно проводится разъяснительная работа, выдаются инструкции. Так, анализ мочи собирается в утренние часы, в чистую емкость, лучше приобретенную в аптеке. Доставить мочу в лабораторию лучше сразу же, т.е. в течение 1-2 часов после сбора, тогда информативность ее будет больше.

Выработка мокроты происходит, как правило, в ночные часы, поэтому ее собирают утром. Важное условие – пациент только прополаскивает ротовую полость, но зубы не чистит, ничего не ест, не принимает лекарства. Именно анализ мокроты позволяет оценить ситуацию непосредственно в бронхиальном дереве, деятельность реснитчатого эпителия, способность, возникновение воспалительного компонента, а также количество лимфоцитов, эозинофилов, присутствие иных составляющих, к примеру, микобактерий.

Подготовка к сдаче анализа: основные правила


Чтобы получить максимально точные результаты диагностики наличия в организме палочки Бордетеллы, необходимо придерживаться нескольких ограничений:

  1. За день до сдачи анализа рекомендовано соблюдать диету – снизить потребление жирной пищи, сладостей, алкогольных напитков. Желательно исключить стрессовые ситуации и серьезные физические нагрузки.
  2. Забор крови производится натощак утром из локтевой вены (у детей 5 мл, у взрослых до 10 мл). Воду пить разрешено. От последнего приема ужина отсчитывают минимум 8 часов.
  3. Повторное обследование нужно пройти спустя две недели после первой серологической диагностики.
  4. Если больной принимает медикаменты, включая антибиотики, он должен рассказать название и дозировку доктору.

В основном перед забором анализов в лаборатории сотрудники предупреждают о том, как правильно сдавать кровь. В профессиональных учреждениях есть свои сайты, где указано, каких правил нужно придерживаться перед приходом к лаборанту. В Инвитро и других крупных медицинских компаниях результаты анализов максимально точные, главное, соблюдать указания врача, чтобы не исказить полученные данные.

В расшифровке серологической диагностики показывают, какой должна быть норма показателей крови. Если в анализе пациента содержится значительное количество антител, которое при повторном обследовании увеличивается, значит, диагноз коклюш подтверждается. Незначительное повышение уровня иммуноглобулинов или антител может говорить о сформировавшемся иммунитете к перенесенному инфекционному заболеванию.

Если пациента направляют на неспецифический гематологический анализ крови с пальца, тогда специальной подготовки не требуется. Главное условие – проводить забор натощак утром. Если по результатам анализа в крови повышенное количество лейкоцитов и нейтрофилов, но СОЭ в норме, то такие изменения характерны для коклюша.

Анализ на коклюш с использованием гематологического метода

Изменения клеточного состава крови: высокое содержание лейкоцитов (лейкоцитоз) и лимфоцитов (лимфоцитоз) при нормальной скорости оседания эритроцитов (СОЭ) чаще выявляются у невакцинированных детей.

В какой бы форме не протекал коклюш, сегодня врачи имеют возможность в ранние сроки провести лабораторную диагностику этого заболевания.

лейкоциты и лимфоциты

Рис. 8. На фото слева лейкоциты, справа — лимфоциты. При коклюше их количество значительно увеличивается.

Бактериологический посев

Микробиологическая диагностика коклюша — это выявление возбудителя на самом раннем этапе возникновения патологии. Ведь после проведения фармакотерапии, особенно приема антибактериальных препаратов, бактерии вряд ли удастся определить.

Для коклюша этиология должна быть выяснена обязательно — спастический кашель может возникать и по иным причинам. Суть исследования состоит в том, что у человека берут биоматериал — мазок с задней стенки глотки, помещают на питательную среду, в стерильных условиях получают колонии бактерии для последующего их изучения.  Оценку результата можно проводить уже через 3—4 суток.

Забор биоматериала занимает всего 2—3 секунды. Дискомфорта при этом пациент не ощущает. Однако, малыши испытывают определенный страх и сопротивляются процедуре. На сегодняшний момент манипуляция довольно проста – слизь из глотки берут ватной палочкой, затем ее наносят на готовую питательную среду в емкости.

Полезно знать:  Основные проявления и лечение коклюша у взрослых

Ранее применялась иная методика, как определить коклюш бактериологическим посевом – больного просили покашлять над чашкой Петри. Капли мокроты при этом попадали непосредственно на питательный раствор. Затем емкость закрывалась крышкой и помещалась в специальные условия, оптимальные для выращивания колоний бактерий. Однако, методика не была столь эффективной, поскольку не все пациенты «правильно» кашляли.

Анализ на коклюш с применением методики флюоресцирующих антител

Низкий удельный вес бактериологического подтверждения заболевания стал толчком к разработке других, более чувствительных методов идентификации возбудителя коклюша. В 60-е годы появился метод определения Bordetella pertussis с помощью флюоресцирующих антител. Специально обработанные мазки просматриваются в флюоресцентный микроскоп. К проведению данного теста допускается только высококвалифицированный персонал, используются качественные реагенты. В противном случае возможно большое количество ложноположительных результатов. Данная методика в практической медицине используется редко.

Bordetella pertussis

Рис. 7. Специально обработанные мазки просматриваются в флюоресцентный микроскоп.

В каких случаях назначают лабораторные исследования

Перед тем, как сдавать анализ на коклюш, необходимо учесть, что симптомы интоксикации не проявляются сразу же после заражения. Затем усиливается ночью и по утрам приступообразный кашель. Лицо больного ребенка краснеет, периодически возникают характерные для коклюша вдохи. Завершается такой приступ отхождением вязкой мокроты либо рвотой.

Периодичность течения заболевания

Названия периодаПродолжительностьПризнаки и симптомы
Инкубационный От дней до 14 суток (в среднем — одна неделя)
Предсудорожный От трех дней до двух недель Сухой навязчивый кашель. Температура нормальная
Судорожный От двух недель до двух месяцев и более Характерные шумные вдохи во время судорожного кашля. Отхождение мокроты или рвота после приступа
Обратное развитие От двух недель до двух месяцев Кашель становится редким. Самочувствие ребенка улучшается
Поздняя реконвалесценция
(выздоровление)
От двух до шести месяцев Приступообразный кашель возникает только при нагрузках, волнении, других заболеваниях

Лабораторный посев и ПЦР-исследование обычно назначают в предсудорожном периоде, когда еще нет специфических вдохов при кашле. Учитываются при этом такие диагностические признаки коклюша, как непосредственные контакты с больным человеком в детском саду, школе или семье. Врач, направляя ребенка на бактериологический посев и ПЦР, также смотрит на результаты общего анализа крови.

  Симптомы и лечение сепсиса у детей раннего возраста

Стоимость анализов на коклюш

Обратите внимание

Цены могут существенно отличаться в каждом из городов РФ.

В частных клиниках и лабораториях бактериологическое исследование на коклюш стоит в среднем 1,5 тыс. рублей. Определение титра антител к коклюшу обойдется по 750-800 рублей за каждый иммуноглобулин. Приблизительно такая же цена и у анализа глоточного соскоба на коклюш методом ПЦР. Дополнительно оплачивается услуга по забору материала: мазки и соскобы – 300-400 рублей, взятие венозной крови – 100-150 рублей.

Как производятся анализы на коклюш

Какие анализы сдавать при предположении инфицирования коклюшем? Первоначально нужно обязательно провести полное обследование. Оно включает в себя: общий анализ крови и мочи, исследование мокроты, флюорография, ИФА диагностика коклюша, реакция агглютинации, латекс-микроагглютинации и, возможно, другие рекомендованные врачом мероприятия. К ним можно причислить ПЦР (молекулярно-генетический способ определения ДНК бактерии), который эффективен в первые две недели после попадания в организм и у не вакцинированных детей. Для людей, прошедших вакцинацию, применяются серологические методики (РПГА, РА, РНГА), позволяющие диагностировать коклюш в более поздние периоды времени.

Биохимический анализ крови на выявление коклюша и паракоклюша делается, чтобы оценить состояние пациента. Для установления полной картины путем выявления возбудителя болезни врач, наряду с вышеперечисленными анализами, может назначить бактериологический посев фрагментов слизи из носовой полости и задней стенки ротоглотки.

Делаться посев может только на ранних стадиях инфицирования коклюшем в течение примерно 3–4 недель, позднее эта разновидность диагностики уже не имеет смысла.

Где сдать анализ на коклюш? Серологический и гематологический анализ материала на коклюш сдается по направлению врача в любой клинической лаборатории. В государственном учреждении диагностика, как у детей, так и у взрослых проводится бесплатно в пределах от 4 до 6 суток. Но в тех обстоятельствах, когда дорога каждая минута и нет времени просиживать в очередях, а потом ждать несколько дней ответов. Тогда, чтобы сдать кровь на коклюш, есть возможность обратиться в частные исследовательские центры, где специалисты произведут все необходимые анализы в более короткие сроки и с повышенным уровнем комфорта. Экспресс-тест ПЦР позволяет получить первые результаты анализов на коклюш уже через несколько часов.

К тому же в подобных учреждениях доступно получить интерпретацию сведений и рекомендации относительно дальнейших действий. Но лучше если расшифровка анализа на коклюш будет производиться лечащим врачом, который знает нюансы течения болезни в конкретном случае и особенности организма пациента. При подтверждении диагноза в анализе крови на коклюш будет присутствовать такие показатели, как лимфоцитоз (значительное превышение нормы численности лимфоцитов) и лейкоцитоз (сильное увеличение количества лейкоцитов).

Источники

  • https://LechenieDetej.ru/analizy/analiz-na-koklyush.html
  • https://MyAnaliz.ru/blood/analiz-krovi-na-koklyush/
  • http://microbak.ru/infekcionnye-zabolevaniya/koklyush/diagnostika-2.html
  • https://pulmono.ru/diagnostika/analizy/analizy-pri-koklyushe-i-parakoklyushe
  • https://orebenkah.ru/analizy-detjam/obshhij-analiz-krovi-pri-kokljushe-u-detej.html
  • https://okeydoc.ru/analiz-na-koklyush-kogda-i-kak-ego-sdayut/
  • http://elaxsir.ru/simptomy/diagnostika/analiz-na-koklyush.html
  • https://MyTerapevt.com/koklyush/analiz.html
  • https://diagnos-med.ru/analiz-na-koklyush-sovremennye-metody-diagnostiki/
  • http://ZdorovyeDetei.ru/infekcii/kak-provoditsya-laboratornaya-diagnostika-analizy-koklyusha-i-parakoklyusha.html
  • https://krov.expert/analiz/obshhij/na-koklyush.html

[свернуть]
Ссылка на основную публикацию